Tripanocidnyj äffekt antitel k rekombinantnomu tubulinu T.brucei

T. b. brucei geny al'fa- i beta-tubulina äxpressirowali w E.coli s ispol'zowaniem plazmidy äxpressii pTrP2 i 3-¿-indoleakrilowoj kisloty w kachestwe induktora. Jexpressirowannye tubuliny analizirowali s pomosch'ü SDS-PAGE i podtwerzhdali western-blottingom, w kotorom oni imeli identichnuü kazhuschuüsq molekulqrnuü massu 50 kDa. Jexpressirowannye tubuliny indiwidual'no rastworqli w 8M mochewine i razbawlqli w 20 raz, posle chego ih koncentrirowali i intensiwno dializowali protiw bufera MES. Posle dializa srednij wyhod kak al'fa-, tak i beta-tubulina sostawil 0,7 g na litr kul'tury. Poliklonal'nye antitela byli producirowany u kazhdogo iz 56 krolikow, immunizirowannyh tremq dozami koncentrirowannyh tubulinow po 150 ili 450 mkg na immunizaciü na odno zhiwotnoe. Vliqnie ätih antitel na T. b. brucei izuchali putem kul'tiwirowaniq T. b. brucei obrazuütsq w 25% antisyworotok, wyraschennyh na krolikah. Antisyworotka ot drugih krolikow ne podawlqla T. b. brucei w kul'ture. Jeti rezul'taty pokazywaüt, chto antitela k bakterial'no äxpressiruemomu tripanosomnomu tubulinu mogut ne byt' citotoxichnymi po otnosheniü k T. b. brucei.