Sviluppo di un saggio di screening ad alta produttività

Gli E2F sono fattori di trascrizione che regolano il ciclo cellulare con un meccanismo diverso. La famiglia E2F contiene otto membri E2F1 - E2F8 e l'interruzione delle vie di segnalazione di E2F è una delle cause dello sviluppo del cancro. La parte teorica riassume le informazioni di base su E2F, la proteina retinoblastoma, il ciclo cellulare e il suo controllo. Si concentra anche sui modi in cui la morte cellulare - l'apoptosi - può essere mediata da E2Fs. La parte sperimentale è incentrata sul test di tre cloni della linea cellulare 293H trasfettati con il costrutto E2F-luciferasi. I cloni con le migliori proprietà sono stati selezionati per lo sviluppo e la validazione di saggi omogenei di screening ad alta velocità in grado di rilevare l'espressione dei geni mediati da E2F. Con questo set up i saggi sono stati validati su composti biologicamente attivi della libreria LOPAC. I risultati riassunti nelle conclusioni valutano il ruolo dell'attivazione o della repressione di E2F in relazione alla sopravvivenza cellulare.