Standardisierung von Ein-Schritt-Echtzeit-PCR-Tests für die reverse Transkription

Die Standardisierung des einstufigen Reverse-Transkriptions-PCR-Tests in Echtzeit ist ein spezifischer, empfindlicher, schneller und kostengünstiger Test für den Nachweis von Influenza-A-Viren, d. h. H1N1 und H3N2, die für die saisonale Grippeinfektion verantwortlich sind. Die Diagnose des Influenza-A-Virus kann durch eine Vielzahl von Diagnosemethoden erfolgen, z. B. durch Isolierung des Virus, konventionelle reverse Transkriptions-PCR und Echtzeit-PCR-Assays für die reverse Transkription. Obwohl die herkömmliche PCR mit reverser Transkription spezifisch, empfindlich, schnell und kosteneffizient ist, ist eine PCR-Analyse nach der reversen Transkription erforderlich. Die konventionelle reverse Transkriptions-PCR liefert jedoch nur qualitative und keine quantitativen Ergebnisse, während die reverse Echtzeit-PCR weniger zeitaufwändig ist und die Wahrscheinlichkeit einer Kreuzkontamination geringer ist als bei der konventionellen reversen Transkriptions-PCR. Es ist keine Post-Reverse-Transkriptions-PCR-Analyse erforderlich und liefert sowohl ein qualitatives als auch ein quantitatives Ergebnis bei geringerer Wahrscheinlichkeit einer Kreuzkontamination. Der einzige Nachteil der Reverse-Transkriptions-PCR in Echtzeit ist, dass für den Test ein teures Gerät benötigt wird.