Production de HFS par la glucose isomérase isolée de E.coli DH5 Alpha

La xylose/glucose isomérase est une enzyme industrielle importante, utilisée depuis des décennies pour la conversion du glucose en fructose. Cette recherche se concentre sur la production de glucose isomérase à partir d'Escherichia coli DH5¿. Les études d'optimisation de la fermentation ont montré qu'une plus grande quantité d'extrait de levure et de tryptone augmentait la croissance cellulaire et que la température optimale de croissance était de 37°C. La purification partielle de la xylose isomérase a été réalisée par traitement thermique et précipitation au sulfate d'ammonium. Une activité maximale du concentré enzymatique a été obtenue à 80 % de la valeur de coupure du sel. La xylose isomérase a montré des activités maximales à une température de 75 °C et à un pH de 8. L'activité enzymatique dans des conditions optimales était de 5,0 U/min/ml pour E. coli DH5¿. L'ajout d'ions cobalt et de xylose a augmenté l'activité de 10 à 20 fois. L'activité spécifique pour E. coli DH5¿ était de 60,5 nmol/min/mg de protéine. Seulement 8% du sirop de D-fructose maximum a été produit en utilisant 100mM de D-glucose comme substrat après 14 jours d'incubation. Par conséquent, E. coli DH5¿ n'est pas un meilleur candidat pour la production de sirop à haute teneur en fructose.