Isolamento e Amplificação de ¿-Lactamage Gene de S.Aureus

O isolado clínico de S.aureus mostrando resistência à ampicilina foi escolhido no presente estudo para isolamento e amplificação do gene ß-lactamase foi amplificado com sucesso a partir do ADN cromossómico usando os iniciadores construídos a partir do gene ß-lactamase da classe (A) da M.tuberculosis H37Rv. O produto PCR foi clonado no sítio SmaI do vector M13 mp18 e o clone positivo foi seleccionado usando 100µg/ml de ampicilina e, além disso, o ADN do clone foi isolado e verificado para a inserção usando os mesmos iniciadores. O produto PCR (0,7Kb) indicou que a clonagem foi bem sucedida, o que também confirmou que a ß-lactamase que confere resistência à ampicilina e a outros antibióticos ß-lactam estava presente no ADN cromossómico de S.aurues.