Grundlegende Einblicke in die Durchflusszytometrie

Die Durchflusszytometrie (Flow Cytometry, FCM) ist das am häufigsten eingesetzte Verfahren einer Familie von Technologien, die auch als automatisierte, analytische und quantitative Zytologie bezeichnet werden. Die durchflusszytometrische Analyse des DNA-Gehalts menschlicher Neoplasien liefert quantitative Informationen über DNA-Ploidie, klonale DNA-Heterogenität und proliferative Aktivität. Die breite Anwendung der FCM ist auch darauf zurückzuführen, dass diese Methode ein Mittel zur Untersuchung der Eigenschaften großer Zellpopulationen darstellt, anstatt sich auf einige wenige Zellen zu konzentrieren, wie dies bei der Autoradiographie der Fall ist, oder auf Durchschnittswerte, wie sie bei biochemischen Messungen von synchronisierten Populationen ermittelt werden. Das Vorhandensein seltener Zellen oder kleiner Subpopulationen bleibt unentdeckt. Die FCM-Technik ermöglicht die Messung der Fluoreszenzintensität einer großen Anzahl von Zellen, die mit Antikörpern markiert sind, die mit fluoreszierenden Reportermolekülen konjugiert sind, um den Anteil der Zellen in einer Population, die ein Antigen exprimieren, genau zu bestimmen. Es können auch zwei oder mehr Antigene gleichzeitig untersucht werden, was die Korrelation der Antigenkonzentration mit dem Zellzyklus ermöglicht. FCM hat sowohl diagnostische (Leukämie und Lymphome) als auch prognostische (Rezeptorexpression) Funktionen.