Entwicklung eines Hochdurchsatz-Screening-Tests

E2Fs sind Transkriptionsfaktoren, die den Zellzyklus über einen anderen Mechanismus regulieren. Die E2F-Familie umfasst acht Mitglieder (E2F1 - E2F8), und die Störung der E2F-Signalwege ist einer der Gründe für die Entstehung von Krebs. Der theoretische Teil fasst grundlegende Informationen über E2Fs, das Retinoblastom-Protein, den Zellzyklus und seine Kontrolle zusammen. Er befasst sich auch mit der Art und Weise, wie der Zelltod - die Apoptose - durch E2Fs vermittelt werden kann. Der experimentelle Teil konzentriert sich auf das Testen von drei Klonen der Zelllinie 293H, die mit einem E2F-Luciferase-Konstrukt transfiziert wurden. Die Klone mit den besten Eigenschaften wurden für die Entwicklung und Validierung von homogenen Hochdurchsatz-Screening-Assays ausgewählt, mit denen die E2F-vermittelte Genexpression nachgewiesen werden kann. Die Assays wurden an biologisch aktiven Verbindungen aus der LOPAC-Bibliothek validiert. Die in der Schlussfolgerung zusammengefassten Ergebnisse bewerten die Rolle der Aktivierung oder Unterdrückung von E2F in Bezug auf das Zellüberleben.