Développement de la Technique d''immunocapture de Coxiella burnetii

La fièvre Q est une zoonose ubiquitaire causée par l''agent pathogène Coxiella burnetii. Les ruminants domestiques sont les réservoirs principaux,et la source de contamination de l''homme. L''environnement joue un rôle principal dans la dissémination de C. burnetii, sous forme d''aérosols contaminés. Mon projet de stage consiste à mettre en place la technique d''immunocapture de C. burnetii, et à l''optimiser afin de l''adapter sur des échantillons environnementaux. L''immunocapture est effectuée avec des billes magnétiques couplées avec des anticorps anti-C.burnetii. Tout d''abord, la spécificité de la technique vis-à-vis de C. burnetii a été vérifiée. Ensuite, plusieurs paramètres de la technique (quantités d''anticorps, de billes et de bactéries) ont été modifiés afin d''optimiser le rendement de la capture. La quantification des bactéries capturées a été effectuée par qPCR TaqMan® La technique de l''immunocapture peut contribuer à l''isolement des bactéries à partir d''une matrice complexe d''une façon spécifique. Elle participe à l''augmentation de l''efficacité d''une PCR lors d''un diagnostic à travers l''élimination des éléments inhibiteurs de la PCR.