Application de la technique de cryotomographie aux rayons X (Cryo-XT)

Le VV (virus de la vaccine) est l'un des virus les plus complexes, avec une taille de plus de 300 nm et plus de 100 protéines structurales. Son assemblage implique des interactions séquentielles et des réarrangements majeurs de ses composants structurels. Dans cette étude, des cellules infectées ont été sélectionnées par microscopie à fluorescence et imagées par microscopie à rayons X dans des conditions cryogéniques. Des séries d'images radiographiques à inclinaison tomographique ont été utilisées pour produire des reconstructions tridimensionnelles montrant différents organites cellulaires (noyaux, mitochondries, RE), ainsi que deux autres types de particules virales correspondant à différents stades de maturation du virus de la vaccine (IV) particules immatures et (MV) particules matures ; Les essais à la witaferine ont montré une liaison à l'actine, qui empêche la polymérisation et l'élongation des filaments, provoquant des virions mal emballés ou aberrants, ce qui inhibe la progression de l'infection virale. Les résultats démontrent que la cryo-tomographie à rayons X est un outil puissant pour recueillir des informations structurelles tridimensionnelles à partir de cellules entières congelées et non fixées.