Análise Transcriptométrica Comparativa usando a Técnica cDNA-AFLP

Uma maior compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos no estabelecimento e desenvolvimento de fungos entomopatogénicos pode ser considerada como um passo importante para a sua gestão eficaz de pragas futuras. Para este fim, tenho aplicado com sucesso duas abordagens diferentes baseadas em PCR - cDNA-AFLPs e Análise quantitativa por PCR em tempo real para identificar os genes de B. bassiana putativamente envolvidos na superação das barreiras específicas dos insectos hospedeiros. O visor de cDNA-AFLP provou ser uma ferramenta muito poderosa para a descoberta de genes de B. bassiana em transcriptoma, tal como com muitos outros organismos em que esta abordagem foi utilizada. Sem qualquer informação de sequência prévia, foi possível obter os primeiros conhecimentos sobre os processos moleculares que conferem versatilidade metabólica ao B. bassiana. No entanto, as experiências de nocaute de genes têm de ser conduzidas para confirmar o seu papel putativo em várias vias metabólicas. Compreender a interligação entre a repressão do metabolismo do azoto e a ausência de diversas subtilisinas como proteases durante o crescimento na cutícula do insecto é fundamental para compreender a versatilidade metabólica do B. bassiana.