Isolierung und Amplifikation des ¿-Lactamage-Gens aus S. Aureus

Das klinische Isolat von S. aureus, das eine Resistenz gegen Ampicillin aufweist, wurde in der vorliegenden Studie für die Isolierung und Amplifikation des ß-Lactamase-Gens ausgewählt, das erfolgreich aus chromosomaler DNA mit Hilfe von Primern amplifiziert wurde, die aus dem Klasse (A) ß-Lactamase-Gen von M. tuberculosis H37Rv konstruiert wurden. Das PCR-Produkt wurde in die SmaI-Stelle des Vektors M13 mp18 kloniert, und der positive Klon wurde mit 100 µg/ml Ampicillin selektiert. Anschließend wurde die DNA des Klons isoliert und mit denselben Primern auf das Insert überprüft. Das PCR-Produkt (0,7 Kb) zeigte an, dass die Klonierung erfolgreich war, was auch bestätigte, dass ß-Lactamase, die eine Resistenz gegen Ampicillin und andere ß-Lactam-Antibiotika verleiht, auf der chromosomalen DNA von S. aurues vorhanden war.